三黍生物

服务介绍 项目列表 技术路线 样本要求 案例解析
  • 目的基因是指所要研究或应用的基因,也就是将要克隆或表达的基因。获得目的基因是分子克隆过程中最重要的一步。目前用于获得目的基因的方法有几种,如限制性内切酶直接分离法、文库筛选法、体外扩增法和人工合成法等,其中限制性内切酶法直接分离目的基因和多聚酶链式反应(PCR)或逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)体外扩增目的DNA片段是目前最常用的方法。
    我公司拥有完整系统的基因克隆技术平台和技术团队,周期短,成功率高,灵活性强,客户只需提供实验样本、RNA、cDNA、DNA片段或者基因序列中任何一种即可。可根据客户不同要求制定个性化实验方案。
     
    1. 服务内容

    • 序列分析;
    • 引物设计;
    • 基因扩增;
    • 测序验证;
    • 返还报告;
     
    2. 服务说明


    • 客户需提供克隆序列信息、GeneBankID或者NCBI登录号等;
    • 目的克隆载体的名称,如不特定要求一般装载在亚克隆载体上,也可指定其他载体(如原核表达载体、真核表达载体、慢病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体等);
    • 提供表达目的片段的组织,细胞或者动物样本。请您尽量提供目的基因表达量高的单一样品,如果基因的丰度较低,请提供尽量多的实验材料。如果提供RNA样品,要求总RNA无降解,无DNA污染,OD260/OD280:1.8-2.0;
    • 可根据客户提供的基因序列信息,采用全基因合成的方法获得目的片段(费用另计),构建到载体中。

     
    3. 反馈客户信息

    • 含有目的片段的高纯度质粒和含有重组质粒的菌液;
    • 提供相应的实验记录、测序结果、酶切位点、电泳图及完整的实验报告;
    • 由于生物实验的不确定性,对于扩增失败的项目,经与客户沟通后,公司将正常收取部分物料费用。
     
    4. 实验周期

    •实验周期15-30天。
  • 1.样品类型

    • 动植物组织:尽量提供目的基因表达量高的单一样品,取下后立即放入液氮中,之后-80℃保存;
    • 血浆:采用肝素类抗凝剂抗凝后,低温离心除去血细胞的液体;
    • 如果提供RNA样品,要求总RNA无降解,无DNA污染,OD260/OD280:1.8-2.0;
    • 取样需要迅速,取材后立刻液氮速冻,干冰保存,过程中必须保持超低温状态。
     
    2.样品浓度及需求量

    • 组织鲜样:1-3g
    • 血液样品至少1ml(血浆注意用肝素钠防凝)
    • 细胞样品为1X107个细胞,其它样本类型请咨询当地销售。
     
    3.生物学重复

    • 无需重复,建议备样2-3份
     
    4.保存和运输

    • 样品请置于 1.5 ml 管或合适管中,管上注明样品名称、浓度以及制备时间,管口使用Parafilm 封口。建议在运输前将所有样品管固定于 50 ml 带盖离心管中,再将 50 ml 管放在封口袋中。干冰运输,不能反复冻融。
     
    5,其他

    • 样品技术需求表务必随样品一起邮寄,由于表格信息不全造成的损失由客户。