三黍生物

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  • 黄酮类化合物以黄酮(2-苯基色原酮)为母核而衍生的一类黄色色素。其中包括黄酮的同分异构体及其氢化的还原产物,也即以C6-C3-C6为基本碳架的一系列化合物。黄酮类化合物在植物界分布很广,在植物体内大部分与糖结合成苷类或碳糖基的形式存在,也有以游离形式存在的。天然黄酮类化合物母核上常含有羟基、甲氧基、烃氧基、异戊烯氧基等取代基。,本公司主要以槲皮素-3-氧-葡糖苷作为标样测定黄酮醇的含量。单宁单体主要为儿茶素等物质,公司已开发了针单宁单体的LC-MS检测平台,可精确测定各组分含量,重复性好,准确度高。
    植物中的黄酮可以使植物适应陆地环境:防紫外线和氧化胁迫;种间相互作用(病原菌,共生),植物发育。在人体中,黄酮的功效也是多方面的,它是一种很强的抗氧剂,可有效清除体内的氧自由基,这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老,也可阻止癌症的发生。黄酮可以改善血液循环,可以降低胆固醇,向天果中的黄酮还含有一种PAF抗凝因子,这些作用大大降低了心脑血管疾病的发病率,也可改善心脑血管疾病的症状。 
      黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环(A-与B-环)通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物,其基本母核为2-苯基色原酮。黄酮类化合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。此外,它还常与糖结合成苷。 


      在大多数植物中,黄酮骨架的生物合成起源于紧跟类黄酮合成分支的苯丙烷途径。


    图2:黄酮生物合成途径。PAL: phenylalanine ammonia lyase; C4H: cinnamate-4-hydroxylase; 4CL: p-coumaroyl-CoA ligase; 4CL-like: cinnamic acid specific CoA ligase; CHS: chalcone synthase; CHI: chalcone isomerase; FNS: flavone synthase; F2H: flavanone-2-hydroxylase; F3′H: flavanone-3′-hydroxylase; F6H: flavanone-6-hydroxylase; OGT: O-glycosyltransferase; FOMT: flavonoid O-methyltransferase; CGT: C-glycosyltransferase; RHM: UDP-rhamnose synthase. 
    Figure 2. Multiple and specialized flavone biosynthetic pathways. Purple path: Newly identified biosynthetic pathway for root-specific flavones in Scutellaria baicalensis. PAL: phenylalanine ammonia lyase; C4H: cinnamate-4-hydroxylase; 4CL: p-coumaroyl-CoA ligase; 4CL-like: cinnamic acid specific CoA ligase; CHS: chalcone synthase; CHI: chalcone isomerase; FNS: flavone synthase; F2H: flavanone-2-hydroxylase; F3’H: flavanone-3’-hydroxylase; F6H: flavanone-6-hydroxylase; OGT: O-glycosyltransferase; FOMT: flavonoid O-methyltransferase; CGT: C-glycosyltransferase; RHM: UDP-rhamnose synthase. 
     
      植物中黄酮类化合物的相互分离以及单一黄酮成份的定量分析,常用高效液相色谱法(HPLC)法,对于总黄酮含量的测定,考虑到方法的快捷、简便和可行性等,主要采用在碱性介质中加铝盐显色的分光光度法。 

      1. 总黄酮测定:
      AlCl3 法其反应原理: 黄酮母核上有3 - O H 和/或5 一 O H,B 环上有邻位二经基时( 这是黄酮类化合物的典型结构),AlCl3可与之生成黄色的黄酮铝配合物,从而进行显色定量。AlCl3法测定时,芦丁、桑色素等黄酮类物质反应强烈,而对酚酸、原花色素的反应很小,因此该法对黄酮类化合物的专属性较强。
      NaNO2 -Al(NO3)3 法其反应原理:酚羟基中的氧和铝产生黄色络合物,加入亚硝酸钠和氢氧化钠,在碱性条件下呈红色,在510nm处有最大吸收,反应显色在60min内稳定,源于芦丁含量测定法,并逐步用于黄酮类化合物的测定,后来发现这并不是黄酮类化合物的专属反应,因为凡具有也只有具有邻苯二轻基的物质,均能用此法进行显色定量。 
      因此,NaNO2 -Al(NO3)3法显色较为稳定,AlCl3法对黄酮类化合物的专属性较强,但又有自己的缺点,所以要根据测试样的特点具体进行选择。 

      2. 黄酮单体测定
      对于常见的黄酮类化合物单体的定量分析可以用高效液相色谱法(HPLC)分析,以常见的黄酮类化合物卢丁、槲皮素、毛地黄黄酮、芹菜素、木犀草素等为标样进行定量分析。 

    图3. (1) rutin, (2) quercetin-3-glucoside, (3) quercitrin, (4) myricetin, (5) luteolin, (6) quercetin, (7) apigenin, (8) kaempferol, and (9) isorhamnetin
     
      对于不常见或尚未有报道的黄酮种类,可以采用液质联用(HPLC-MS)分离与鉴定

    图4: (a) Flavone profiles of transgenic leaves. (b) The MS/MS fragmentation patterns of peak f2. (c) The MS/MS fragmentation pattern of f4.
     
  • 序号 中文名称 英文名称
    1 芹菜素 Apigenin
    2 芹菜素7-O-葡糖苷酸 Apigenin 7-O-glucuronide 
    3 蓄苷、柳叶素 Avicularin 
    4 生物茶素 Biochanin A 
    5 紫花牡荆素 Casticin 
    6 大豆甙元 Daidzein
    7 二氢莰 Dihydrokaempferol 
    8 二氢杨梅素 Dihydromyricetin 
    9 圣草次苷 Eriocitrin 
    10 圣草酚 Eriodictyol 
    11 金雀异黄素 Genistein
    12 银杏黄酮混合物 Ginkgo Biloba Flavonoids Mix 
    13 绿茶儿茶素混合 Green Tea Catechin Mix 
    14 扁蓄苷|  Guaiaverin
    15 橙皮苷 Hesperidin  
    16 异荭草素 Isoorientin 
    17 异鼠李素 Isorhamnetin 
    18 异水飞蓟素A. Isosilybin A
    19 异水飞蓟素B Isosilybin B
    20 异牡荆 Isovitexin 
    21 山萘酚3-葡萄糖苷 Kaempferol 3-glucoside 
    22 木犀草素 Luteolin 
    23 杨梅素 Myricetin 
    24 柚皮素4',7-二甲醚 Naringenin 4,7-dimethyl ether
    25 柚皮甙 Naringin 
    26 新橙皮甙 Neohesperidin 
    27 川陈皮素 Nobiletin
    28 新橙皮苷二氢查尔酮 Neohesperidin dihydrochalcone

  • 技术路线
     
     
    技术优势:
    • 高通量,一次可鉴定多种组分;
    • 高灵敏度,下限低至1 ng;
    • 检测方法多,可选用UPLC或者LC-MS;
    • 重复性好,同批次样本RSD<2%;
    • 方便快捷,可在一周内出结果;
    • 服务周到,提供售前咨询、售后技术支持;
     
    注意事项:
    • 测试方法默认为公司常用方法,如果客户需要自己提供检测方法或者采用国标法,请提前告知。
    • 需严格按照送样要求备样、取样和送样。
  • 1 样品类型
    植物鲜样、干样、液体样本等;
     
    2 生物学重复
    建议3次生物学重复;
     
    3 样品需求量
    鲜样:多余2 g
    干样:多余1 g
    液体样本:多余 2ml
     
    4 样品准备
    1,取样前需要设定好对照组、实验组,每组建议3次以上生物学重复。
    2,鲜样取样时需要迅速,在时间上尽量保持一致;取材位置要统一,保证统一生理位置。
    3, 鲜样样品取材后要立刻液氮冷冻,干冰或-80度低温冷藏。干样常温存储和邮寄。
    4, 不建议客户做任何前处理,取材后寄给我公司即可。
     
    5 保存和运输
    样品请置于合适管中,管上注明样品名称、浓度以及制备时间,管口使用Parafilm 封口。建议在运输前将所有样品管固定于 50 ml 带盖离心管中,再将 50 ml 管放在封口袋中。干冰或冰袋运输,不能反复冻融。
     
    6 样品标记要求
    双标记,寄样管、寄样袋均写清楚样品编号;样本命名尽量避免简单的A/B/C或者1/2/3,建议客户采用字母加数字编号,避免重复;
     
    7 其他
    样品技术需求表务必随样品一起邮寄,由于表格信息不全造成的损失由客户。