服务简介
蛋白质非标记定量技术(Label Free)是一种不依赖于同位素标记的非标记蛋白组定量技术,通过液质联用技术对蛋白质酶解肽段进行质谱分析,无需使用昂贵的稳定同位素标签做内标,只需分析大规模鉴定蛋白质时所产生的质谱数据,比较不同样品中相应肽段的信号强度,从而对肽段对应的蛋白质进行相对定量。三黍生物公司采用Thermo Fisher的Q Exactive /Q Exactive Plus/Q Exactive HF质谱平台结合Nano-LC,推出基于Label Free的定量蛋白组分析技术服务。
应用领域
生长发育机制研究
疾病发生机制研究
药理学研究
生物标志物研究
疾病分子分型
技术路线
研磨称量
蛋白抽提
酶解纯化
上机检测
搜库对比
数据分析
出具报告
技术优势
可以进行蛋白的“有/无”比较分析;
无需同位素标记,成本低;
实验周期短;灵活性强,没有样本数量的限制;
样本要求
1、样品类型
动物组织;细胞;微生物(细菌/真菌);液体类(血液/尿液/脑脊液/灌洗液/关节液等)。
2、生物学重复
建议3次生物学重复。
3、样品需求量
动物组织≥200mg;细胞≥107;微生物(细菌/真菌)≥200mg;液体类≥2.5ml;特殊情况请与公司联系。
4、样品准备
样本准备基本原则有:代表性原则;迅速性原则;分装备份原则;污染控制原则;低温原则。公司可提供详细的样本准备和运输指南。
5、保存和运输
样本用液氮速冻,-80度保存或者直接干冰寄送即可。
6、样品标记要求
样品标记清晰,尽量使用英文和数字组合,字符数在15个以内为好。同时按照公司的技术需求表填写样本详细信息。
7、其他
样品技术需求表务必随样品一起邮寄,由于表格信息不全造成的损失由客户承担。
结果示例
部分分析结果示例
参考文献
1) Accurate proteome-wide label-free quantification by delayed normalization and maximal peptide ratio extraction, termed MaxLFQ.
2) Mass Spectrometry-Based Label-Free Quantitative Proteomics.